Change search
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Terpenmetabolism i Artemisia annua: rekombinant produktion och karaktärisering av seskviterpensyntaser.
Linnaeus University, Faculty of Health and Life Sciences, Department of Chemistry and Biomedical Sciences.
2015 (Swedish)Independent thesis Basic level (degree of Bachelor), 180 HE creditsStudent thesis
Abstract [sv]

Malaria är en tropisk sjukdom som orsakas av encelliga organismer, protozoer från Plasmodium släktet. Varje år drabbas ungefär en halv miljard människor av malaria och cirka en miljon av dessa dör. Okomplicerad malaria är en mild form av malaria som enligt WHO rekommendationer ska behandlas med artemisinin baserad kombinationsterapi (ACT). Artemisinin produceras naturligt i låg mängd från växten Artemisia annua. Trots att medicinen har visat sig effektiv mot malaria med färre biverkningar är den höga kostnaden en nackdel. Forskning pågår för att hitta nya syntetiska vägar för framställning av artemisinin i växten genom att studera terpenmetabolism och vilka aktiva enzymer det finns som har en avgörande roll i utbytet av artemisinin i växten. Syftet med denna studie var att med hjälp av genteknik och molekylärbiologiska metoder producera och identifiera två rekombinanta enzymer, seskviterpensyntaser från A. annua. Experimentet inleddes med att transformera klonade T-DNA (AaTS-1 och AaTS-2) som kodar för seskviterpensyntaser från A. annua med hjälp av Agrobacterium tumefaciens vartefter transienta transkriptionen av generna som finns i en binär vektor initierades i blad från växten Nicotiana benthamiana genom infiltration. Totalt RNA extraherades från växten och översattes till cDNA för att sedan studera förhållandet av transient uttryck i bladen med qPCR. Enzymerna extraherades från bladen och inkuberades med farnesyldifosfat övernatt och produkten identifierades följande dag med gaskromatografi-masspektrofotometri (GC-MS). Resultatet blev att inget genuttryck av AaTS-1 och AaTS-2 kunde detekteras i bladen. Resultat från GC-MS visade att ingen proteinprodukt genererades. De negativa resultaten berodde främst på brist av resultat som verifierar att plasmiderna var konstruerade med selektionsgenerna, men även på grund av en icke effektiv transformation, orsakad av bakteriecellklumpar som förhindrade infiltreringsmedium att nå inre delarna av bladen.    

Place, publisher, year, edition, pages
2015. , 25 p.
Keyword [sv]
Artemisinin; Artemisia annua, agroinfiltreration
National Category
Biomedical Laboratory Science/Technology
Identifiers
URN: urn:nbn:se:lnu:diva-45226OAI: oai:DiVA.org:lnu-45226DiVA: diva2:835797
Subject / course
Biomedical Sciences
Educational program
Biomedical Laboratory Science Programme, 180 credits
Supervisors
Examiners
Available from: 2015-09-28 Created: 2015-06-30 Last updated: 2015-09-28Bibliographically approved

Open Access in DiVA

Terpenmetabolism i Artemisia annua(897 kB)163 downloads
File information
File name FULLTEXT01.pdfFile size 897 kBChecksum SHA-512
1310325fa67c92d1304183c5eaeaca7fa609a5a8b0a7fc104a1c13416f1e495f103a94c18ef9bedacc4a8e4d20a774841d9218b9080c79bd8ee9fb3fa3b767ce
Type fulltextMimetype application/pdf

By organisation
Department of Chemistry and Biomedical Sciences
Biomedical Laboratory Science/Technology

Search outside of DiVA

GoogleGoogle Scholar
Total: 163 downloads
The number of downloads is the sum of all downloads of full texts. It may include eg previous versions that are now no longer available

urn-nbn

Altmetric score

urn-nbn
Total: 258 hits
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf